（1）收集细胞（细胞数量为100-10⁴ 个^①）

A．将转到离心管中的细胞，4℃，1000-1100rpm，离心5 min，小心吸掉培养液；

B．用100μL PBS 重悬细胞，4℃，1000-1100rpm，离心5 min，小心吸掉上清。

（2）向离心管中加入适量体积（推荐体积为50-200μL）预先配制的溶液A与溶液B的混合液^②，轻轻弹动管底5次，使细胞充分裂解，于冰上放置10 min。

（3）加入两倍体积的无水乙醇，颠倒混匀，-20℃条件下沉淀20 min以上。

（4）取出后，4℃，12000 rpm，离心20 min，弃上清。

（5）加入400-500 μL 预冷的 75 %乙醇洗涤沉淀，4℃，12000 rpm，离心10 min，用移液器小心吸掉上清，自然晾干（不超过 5 min 为宜）。

（6）加入适量体积（推荐体积为 10-30 μL）灭菌的重蒸水溶解沉淀，直接用于PCR 反应^③，或于-20℃保存。

※注意：

①细胞数目大于1x10⁴时，建议在步骤3前加入等体积的酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）,震荡混匀后，4℃，12000 rpm, 离心 20 min，取上层液体，移入新的离心管；

②混合液中溶液A与溶液B的体积比例为 20:1，为确保使用效果，混合液请尽量现配现用，4℃ 可保存 15 天。

③推荐参考的 PCR 体系（10 μL）如下：

④若样本用于反转录成 cDNA,则需要用 DNase I 消化 TNA 中的 DNA。

GenlociTNA抽提试剂盒使用说明书.pdf

Q&A

Q-1:提取的基因组DNA中，质量如何？
A-1：最大限度去除样品中杂质蛋白及其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。获得的DNA可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
 

Q-2:使用时，试剂盒中两个组分配比是多少？
A-2：溶液A与溶液B的体积比例为20:1，为确保使用效果，混合液请尽量现配现用，4℃ 可保存15天。按一次使用量为200uL算，6mL的该试剂盒是30次的量。

Q-3:TNA抽提试剂盒的应用范围有哪些？
A-3：可应用于细胞、动物和植物组织及各种微生物，只需微量的样品就可获得高质量的基因组DNA和总RNA。